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Seleccionar sales en solución tampón con el límite correcto de pH para la reacción . Proteínas y reacciones individuales tienen requisitos específicos de pH. Los requisitos se expresan explícitamente en el protocolo de reacción, se presenta en la documentación que acompaña a la proteína /muestra o registrados en los volúmenes de referencia tales como el Manual de Química y Física . PH de una solución tampón óptimo debe caer lo más cerca posible a la unidad de pH de la reacción y nunca debe exceder el valor de más o menos 1 pH . Sales de solución tampón están disponibles como un paquete o se pueden mezclar componentes de primas siguiendo recetas ampliamente disponibles .
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Vierta la solución tampón en un vaso de precipitados de 1 litro . Añadir 1 litro de agua destilada. Ponga una barra de agitación en el vaso y colocar el vaso de precipitados sobre una placa de agitación . Active la placa de agitación a un bajo al ajuste medio. Revuelva hasta que no hay cristales de solución tampón permanecen visibles .
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Colocar 100 ml vaso debajo aguja de prueba del medidor de pH . Limpie la aguja rociándolo con agua destilada . El vaso de precipitados se pondrá al día la carrera off . Calibrar el medidor de pH mediante las soluciones de calibración . Limpie la aguja de nuevo. Deseche el contenido de escorrentía capturados en el vaso de 100 mililitros .
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Lleve el medidor de pH de la placa de agitación y vaso de precipitados de 1 litro . Introducir la aguja de prueba en la solución tampón. Pulse el botón de cálculo del medidor de pH para determinar el pH de la solución . Si este valor es demasiado alto o bajo , la solución requiere los siguientes pasos adicionales .
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Coloque una punta de micropipeta fresca en la micropipeta . Active la placa de agitación a baja velocidad. Si el pH es demasiado alto, utilizar la micropipeta para añadir una gota a la vez de ácido clorhídrico a la solución. Deje que la placa de agitación para mezclar la solución y medir el pH . Repetir el proceso hasta que el pH de la solución es el valor necesario. Si el pH es demasiado bajo , repita este paso utilizando hidróxido de sodio en lugar de ácido clorhídrico.