Cómo hacer un tampón de transferencia Bis - Tris

El acoplamiento de bis - tris es importante en la bioquímica debido a su capacidad para actuar como un zwitterión , que posee un ion positivo y negativo en la molécula. Puede servir como un amortiguador en la región de pH 7,6 . Se añade a los geles utilizados en la electroforesis para ayudar a mantener las moléculas en solución y ayuda en la separación de las moléculas. Tampones de transferencia de eliminar las moléculas de placas de gel de análisis de electroforesis y la transferencia a membranas de Western Blot. Cada fabricante de los informes de los equipos de electroforesis ligeramente diferentes recetas para hacer un tampón de transferencia , pero la siguiente es para el tampón de transferencia se utiliza con sistemas NuPAGE en samples.Things no reducidas que necesitará
Bicina
Bis - tris
EDTA
250 ml vaso
metanol
botella ml 1000
agua ultrapura
Mostrar Más instrucciones Matemáticas 1

Preparar los ingredientes para el buffer mediante el pesaje las cantidades de cada componente en una balanza analítica . Los tres componentes secos para un tampón de transferencia es bicina , bis - tris y EDTA . Pesar 4,08 bicina gm , 5,23 g de bis - tris y 0,29 g de EDTA en papeles individuales de pesaje .
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Añadir estos componentes a un vaso de 250 ml . Disolver estos componentes con 100 ml de metanol. Revuelva hasta que se disuelven los sólidos .
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La transferencia de los componentes disueltos en una botella de 100 ml y lavar vaso con agua ultrapura para asegurar la transferencia de todos los componentes .
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Llenar el resto del volumen de 1 litro con agua ultrapura . Añadir el agua en porciones que permiten suficiente mezcla entre cada adición. Mezclar bien el contenido para conseguir una concentración uniforme.