Cómo solucionar un Primer Dimer

La reacción en cadena de la polimerasa , o PCR , es una técnica en la biología molecular se utiliza para amplificar regiones específicas de ADN. PCR es dependiente de cebadores , que son hebras cortas de ADN que son complementarias y específico para el ADN de interés . Mientras cebadores generalmente se unen a ADN que emparejan su secuencia , que en ocasiones se unen y amplían entre sí , provocando el fenómeno conocido como dimer.Things imprimación que necesitará
Primer secuencias de
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Examinar el contenido de GC ( número de G y C 's) en su secuencia del cebador . GC unión es más fuerte que AT unión debido al enlace de hidrógeno adicional entre la guanina y citosina . Unión óptima es al menos un 50 por ciento de contenido GC .
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Examine la temperatura de hibridación de la reacción. Las bajas temperaturas de recocido, generalmente definidos como 55 C o menos , pueden hacer que la unión no específica de la imprimación , que puede causar dímeros de cebadores , además de la amplificación de las secciones genómicas incorrectos .
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Doble -check la cantidad y la concentración de los cebadores que agregó a la PCR . Un exceso de cebadores , por lo general más de 75 picomoles , puede causar dímeros de cebadores , también.