El videojuego Final Fantasy VIII cuenta con una historia que gira en torno a Sq
fiestas de adolescentes en el exterior significan menos limpia diversión y más p
Espejos han estado en uso desde el siglo 17 y han llenado tanto un propósito fun
Las algas y los hongos tienen una relación simbiótica porque juntos se unen para
? Rupturas en la corteza de la Tierra , los volcanes contener el magma , que en
Se puede jugar con figuras de personajes animados japoneses ( coloquialmente con
rocas se funden en lo profundo de la Tierra y la forma de magma . Cuando una roc
cortadores de plasma operan mediante el uso de un gas inerte y un arco eléctrico
Algunos pasos básicos se pueden tomar para acelerar el proceso general de clonación TOPO y ayudar a asegurar su éxito . En primer lugar, los tubos de células viables deben ser colocados en hielo para mantener su aceptabilidad. A continuación, el super cultura óptimo ( SOC ) medio, el crecimiento bacteriano enriquecido con nutrientes , debe estar a temperatura ambiente. Las placas selectivas deberían entonces ser pre - calentado a 37 grados centígrados por lo que son plenamente listo cuando llegue el momento de usarlos.
Combinando ingredientes
Para comenzar la clonación proceso , una combinación de 2 microlitros de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR ) de productos, 0,5 microlitros de solución de sal , y 0,5 microlitros de vector de clonación se debe combinar en un tubo de centrífuga de 0,5 mililitros . Una vez combinados , habrá que establecer a temperatura ambiente y se dejó incubar durante cinco a diez minutos estos ingredientes . A continuación, se añaden los ingredientes se combinaron para " Top- 10 células químicamente competentes" en un tubo de 50 microlitros y se colocan en hielo durante otros diez minutos. Después de esto, las células deben ser impactados por calor 42 grados Celsius y se colocan exactamente en hielo durante un minuto adicional antes de añadir 180 microlitros de medio SOC. Esta mezcla debe agitarse en una dirección horizontal a 200 rpm durante una hora adicional a 37 grados Celsius.
Pasos Finales
Una mezcla de 50 microlitros y 100 microlitros de cada reacción deben sembraron " en LB + AMP placas + X - Gal e incubar sin agitar durante la noche a 37 C. " Al día siguiente, las tres colonias blancas de cada reacción debe ser recogido y se coloca en 4 ml de LB + AMP y se deja incubar durante la noche a una temperatura de 37 grados centígrados con agitación a 200 rpm . El paso final es la mini - preparación de los plásmidos y esperando a ver si el proceso se ha realizado correctamente .