Cómo identificar bacilos grampositivos

Desde la década de 1880 , la prueba de tinción de Gram sigue siendo un importante método de identificación bacteriana y clasificación . Los microbiólogos suelen realizar la prueba de Gram como el primer paso en la identificación de determinados tipos de bacterias en forma de bastón del género Bacillus. La tinción de Gram es el nombre de su inventor , bacteriólogo danés Hans Christian Gram . La técnica funciona debido a una diferencia en gramos fisiología de la pared celular bacteriana positivas y Gram negativas . Barras positivas Certain gram causan graves enfermedades como el ántrax y tetanus.Things que necesitará
ropa de laboratorio
Guantes
cubiertas para zapatos
Olla de presión
bacterias colonia
Agar
Petri platos agua
Inoculación bucle
Vidrio diapositiva
metanol
Mechero Bunsen sobre Crystal mancha violeta
reactivo mancha de yodo
decolorante
safranina
solución fucsina
papel absorbente
microscopio de
Mostrar más Instrucciones Matemáticas 1

Asegure el uso de un espacio limpio de laboratorio aséptico para llevar a cabo la prueba de tinción de Gram . Use ropa de laboratorio y el calzado, limpios para evitar la contaminación . Use guantes y una máscara cuando se manejan cultivos bacterianos . Aislar una colonia de bacilos para su prueba y crecer sobre agar nutriente rico en placas de Petri . Esterilizar los platos de petri y agar con una olla a presión antes de usar .
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Añadir unas gotas de agua limpia a la placa de cultivo . Distribuir uniformemente sobre el agar . Arrastre un asa de siembra ligeramente a través de la superficie del agar . Transferir la muestra en un portaobjetos de vidrio limpio y untarlo uniformemente en el área circular del tamaño de una moneda de diez centavos . Mantener el tamaño de la muestra mínima; usted debería ser apenas capaz de verlo con el ojo desnudo .
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Aplicar 95 por ciento de metanol sobre el frotis de diapositivas durante dos minutos para fijar las células y prevenir la distorsión de su morfología . Seque al aire la diapositiva o calentarla suavemente sobre una llama de un mechero Bunsen bajo . Mueva la corredera hacia atrás y hacia adelante para calentar de manera uniforme y evitar puntos calientes localizados. Aplicar el calor de manera uniforme y consistente. Evite tomar la diapositiva de la llama hasta que haya terminado de calentamiento.
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Pour reactivo colorante cristal violeta sobre la corredera fija. Deje reposar durante 30 a 60 segundos. Lavar la mancha con agua del grifo durante unos pocos segundos . Escurra el exceso de agua de la diapositiva . Cubrir el portaobjetos con el reactivo de tinción de yodo durante 30 a 60 segundos . Lavar el yodo con agua del grifo . Incline la diapositiva y agregue unas gotas de decolorante . Aplicar hasta que la escorrentía es limpio. Lavar el portaobjetos .
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Remoje la diapositiva con rosa de color safranina reactivo contra- tinción durante 30 segundos. Puede sustituir la solución de fucsina básica para la safranina . Lave suavemente el portaobjetos y agite el exceso de agua . Séquelo con papel absorbente y luego aire seque el portaobjetos . Examine el portaobjetos preparado bajo un microscopio equipado con una fuente de luz . Puedes buscar e identificar bacterias gram positivas varillas con coloración azul o violeta de la prueba de tinción de Gram .