Cómo purgar medio de cultivo celular con nitrógeno

Estudios biológicos utilizan cultivos de células para investigar los efectos de los fármacos , terapias y prácticas sobre los ciclos de vida y actividad de las células . El crecimiento de las células y el mantenimiento de líneas celulares ocurren en medios de cultivo que es beneficioso para las células en cuestión . Los medios de comunicación proporciona todos los nutrientes y las condiciones ambientales requeridas por las células. La mayoría de las células necesitan una fuente de nitrógeno para permanecer sanos y acceder a algunos de los requisitos para los muchos procesos de las células se someten durante su ciclo de vida. Mientras que el nitrógeno se puede obtener a partir de amoníaco y otras sustancias que contienen nitrógeno , purgando los medios de comunicación también proporciona una fuente para los nitrogen.Things necesarios que necesitará
medio de cultivo celular
grande vaso
agitador mecánico
Nitrógeno tanque
tubo Sparging
Mostrar Más instrucciones Matemáticas 1

Vierta el medio de cultivo celular en un vaso grande y colocar el vaso en un agitador mecánico . El agitador se mezcla el medio durante la purga de la corriente de nitrógeno . El uso de este método permitirá una preparación de una gran cantidad de medio a mantener la composición más uniforme.
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Fije un tubo de rociado a la salida de un tanque de nitrógeno . Un tubo de rociado se compone de un tubo de vidrio con una punta de vidrio sinterizado incorporado en el extremo del tubo . El extremo abierto del tubo unido a una longitud de tubo de plástico conectado a un tanque de nitrógeno proporciona un flujo de nitrógeno a medida que sale al final de vidrio sinterizado del tubo por muchas corrientes de pequeñas burbujas de gas .
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Coloque el extremo de vidrio sinterizado del tubo de burbujeo en la parte inferior del vaso de precipitados y encienda el mezclador. Ajuste la velocidad de agitación del agitador mecánico para proporcionar una mezcla uniforme del medio.
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Activar el flujo de nitrógeno a la cubeta y dejar que la burbuja en el medio . El nitrógeno se saturará el medio con nitrógeno medida que se disuelve . Cada líquido posee una solubilidad finita de diferentes gases . Como el nitrógeno se disuelve en el medio , otros gases disueltos son expulsados ​​del medio. La purga elimina los gases tales como oxígeno y dióxido de carbono del medio de cultivo .
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Permitir la corriente de nitrógeno a burbujear al menos 15 minutos para saturar el medio , dependiendo de la velocidad de flujo del gas. Una vez que la purga del medio está terminado , retire el tubo de vidrio sinterizado del vaso de precipitados y transferir el medio de cultivo celular purgado a un recipiente cerrado y almacenar en el refrigerador . La temperatura reducida del refrigerador reducirá el grado en el que los gases se disuelven en el medio durante el almacenamiento .